江苏省疾病预防控制中心(江苏省预防医学科学院)
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2026-05-25

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2026年度采购需求公告(第94批)-饱和突变文库合成

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  为便于供应商及时了解采购信息,现将江苏省疾病预防控制中心2026年度采购需求(第94批)予以公告,具体内容如下:

  需求参数:1.将科室提供的pH2rU3-WT_HA(包含全长 1.7 kb H5N1 HA 野生型基因的慢病毒表达质粒,总大小10357bp)。H5N1 HA 蛋白绝对编号的 第 158 位至 207 位(从信号肽 M 氨基酸开始算起的 50 个连续氨基酸,对应 150 bp 区域。确切核苷酸位置将在全序列中精准标出)。对该50个位点进行单点饱和突变。

  2.文库要求:

  (1)核心技术路径

  合成方式:必须采用高通量芯片电化学合成引物池(Oligo Pool)及后期精准组装工艺。不接受传统手工混合简并引物(NNK/NNN)构建方式,以确保初始序列的精确可控性。

  密码子精确控制: 供应商需具备三联体(Trimer)或同等精度的单体合成控制能力。要求能够实现 20 种氨基酸在指定位点的任意比例定制(0.5% - 90%)且要求具备在指定饱和突变位点中精确剔除或引入特定密码子(如指定位点引入 TAA/TAG/TGA 终止密码子,而其他位点完全剔除无义突变)的能力。

  (2)关键技术指标

  文库均一性(核心指标): 最终交付的质粒文库需经深度 NGS 验证,其均一性指标 Skewness(90%/10% 分布比值)需 ≤ 3.0。

  突变准确率:目标区域内的突变覆盖率(Coverage)必须 ≥ 99%。要求大于 80% 的突变位点,其实际检测丰度与理论设计丰度之间的偏差需控制在 ±50% 以内。

  库容量要求: 针对 50 个及以上连续氨基酸位点的饱和突变,交付的独立克隆数(CFU)必须 ≥ 1.0 × 10⁶,以确保在大规模筛选中无瓶颈效应。

  序列完整性控制: 必须具备严密的计算算法支持(即密码子优化平台),在 1.7 kb 全长 HA 基因环境下,确保非目标突变区间的核苷酸准确率高于 99.9%。

  (3)交付标准及验证方案

  产品规格:提供 > 100 µg 转染级、无内毒素(Endotoxin < 5 EU/mg)的高纯度大提质粒。 NGS 验证报告是必须随货提供完整的实验步骤,详细的 NGS 扩增子原始数据全序列分析报告,报告内容须包含每个位点的氨基酸分布频率柱状图、文库稀释曲线(Rarefaction Curve)及覆盖率统计。针对特定终止密码子(TAA)引入成功率的量化数据。

  有意向者须提供公司资质、报价单(单独成PDF附件,需加盖公章、注明联系人、联系方式、单价、总价、货期等)等资料发送至:jscdczw@jscdc.cn,邮件主题以“项目名称+公告批次+公司名称”命名,报名截止时间:  2026年5月29日 15点 30 分,以邮件发送时间为准。

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